带您了解病理科的色彩艺术——特殊染色

显微镜下的奇妙世界，揭示了细胞的基本结构，苏木精 — 伊红染色法（简称 HE 染色）可以将细胞的胞核染成蓝色，胞浆染成红色，事实上，镜下的色彩并不是如此单调，还有一种染色技术，能为我们呈现出更加五彩斑斓的微观世界，接下来让我们一起走进病理科的特殊染色。什么是特殊染色特殊染色是一种非常重要的病理学技术。它是使用某些特殊的染料和特定的方法，显示常规染色中无法观察的细胞结构与组织成分，还可以显示病理过程中出现的异常物质、病变、病原体等。在病理诊断、鉴别诊断中…

干货分享：常用的蛋白分析技术——WB实验操作步骤详解

WB实验，是一种常用的蛋白分析技术。实验中每一步的把握，将会直接影响结果的显现。本文将给大家展示WB实验的详细操作步骤。跟小编一起来看看吧~蛋白样品的提取及蛋白含量的检测蛋白样品的好坏，直接决定了能否做出来蛋白条带，所以蛋白样品的提取需严格按照试剂盒说明书进行。凝胶配置凝胶选择：请根据蛋白分子量的大小，选择合适浓度的分离胶，可参考凝胶配置试剂盒中的说明书，或者参考文献。配胶的APS需要在4° 的冰箱中保存。注意，配胶的时候，胶一定一定要混匀。配胶的试剂中，…

四大分子互作技术（ChIP/荧光素酶/Co-IP/Pull-down）实验原理全解析

导语在生命科学领域，分子间的相互作用是调控生命活动的核心机制。无论是DNA与蛋白质的“密码对话”，还是蛋白质之间的“协作网络”，都需要通过精准的实验技术来揭示。本文用通俗易懂的语言，带您了解ChIP、荧光素酶报告基因、Co-IP、Pull-down四大技术的原理、步骤和应用场景，助您轻松掌握分子互作研究的核心工具！一、ChIP（染色质免疫共沉淀）：捕捉DNA与蛋白的“约会证据”原理ChIP技术通过甲醛交联“冻结”DNA与结合蛋白的相互作用，利用特异性抗体捕获目标蛋白及其结合的DNA片…

【看这一篇就够了】肿瘤T细胞亚型鉴定——常见T细胞Marker基因全解析

T淋巴细胞（T-lymphocyte）是来源于骨髓的多能干细胞，在抗感染与抗肿瘤中起到重要作用。在人体胚胎期和初生期，骨髓中的一部分多能干细胞或前体T细胞迁移到胸腺内，在胸腺激素的诱导下分化成熟，成为具有免疫活性的T细胞。成熟的T细胞经血流分布至外周免疫器官的胸腺依赖区定居，并可经淋巴管、外周血和组织液等进行再循环，发挥细胞免疫及免疫调节等功能。T细胞的再循环有利于广泛接触进入体内的抗原，加强免疫应答，较长期保持免疫记忆[1]。T细胞的细胞膜上有许多不同的标志物，主要…

动物行为学丨4种动物行为学迷宫的比较

在非临床有效性研究过程中，主要采用行为学试验研究药物对动物学习记忆功能的影响。人和动物的内部心理过程是无法直接观察到的，只能根据可观察到的刺激反应来推测脑内发生的过程，对脑内记忆过程的研究只能从人类或动物学习或执行某项任务后间隔一定时间，测量他们的操作成绩或反应时间来衡量这些过程的编码形式、贮存量、保持时间和它们所依赖的条件等等。学习、记忆实验方法的基础是条件反射，各种各样的方法均由此衍化出来。目前已经建立了大量的学习记忆研究的行为学方法，各有优…

qPCR | 荧光定量PCR的曲线，你了解多少？

荧光定量PCR（qPCR）是一种在标准PCR技术基础上演变而成的技术，主要用于定量样本中的DNA或RNA。它通过监测每个PCR循环中扩增产物的量，实现对靶点起始量的精确测定。本文将深入探讨荧光定量PCR中的关键曲线，包括扩增曲线、熔解曲线和标准曲线。 qPCR扩增程序荧光定量PCR的扩增程序分为扩增反应阶段和熔解反应阶段。1.扩增反应阶段扩增反应阶段采用两步法，即每个循环结束后，即刻检测荧光信号。这种实时监测方式使得qPCR能够动态地捕捉扩增过程中的荧光信号变化，进而生成扩增曲线。…

全面解析：单细胞核转录组测序的优势与必要性

在单细胞测序领域，研究者常权衡于采用单细胞核转录组测序（snRNA-seq）或单细胞转录组测序（scRNA-seq）。目前，从已发表的文章来看，scRNA-seq是主流方法，但该方法仍存在一定局限性。对于scRNA-seq，无论制备单细胞悬液还是制备原生质体悬液都需采用热酶解法，然而越来越多的研究表明，在这种条件下细胞可能受到刺激，导致胁迫相关应答基因表达增加，从而“人为改变”细胞的转录模式，引起转录偏好，最终导致所获得的数据无法真实反映细胞的转录状态，降低了数据的可靠性[1-6]。snR…

如何合理地设计动物实验？看这篇文章就够了 ！

动物实验作为临床前研究的核心内容，其中实验动物是药物临床前研究的最重要的实验材料和对象，科学合理应用实验动物是关系到临床前研究的关键环节在开展临床前整体动物实验时，如何合理地设计动物实验从而科学有效地阐释实验结果是至关重要的。临床前动物实验设计1.动物的选择在刚开始设计动物实验时，可能很多人都会有这样的疑问：在进行临床前的研究过程中我们究竟该如何选择实验动物的种属呢？根据实验目的和要求来选择，实验动物选择一般需要满足以下原则：相似性原则：研究对象各…

国自然的前沿热点解析|IF=12.2！巨噬细胞和肠道微生物火花四射！

离2025年国自然申请的日子越来越近啦！各位科研小伙伴们是不是还在为如何改标书而感到头疼呢？别担心！这可是一个大好时机！我们可以一起探索那些新晋的研究热点，看看如何将它们与我们手头的实验数据巧妙“对接”。抓住机会，玩转研究，把你的项目打磨得更完美，向国自然“进攻”吧！让我们共同加油，开启科研新篇章！

细胞实验 ▏细胞凋亡之Hoechst染色实验

细胞凋亡之Hoechst染色实验 细胞凋亡是指为维持内环境稳定，由基因控制的细胞自主的有序的死亡。细胞凋亡与细胞坏死不同，细胞凋亡不是一件被动的过程，而是主动过程，它涉及一系列基因的激活、表达以及调控等的作用，它并不是病理条件下，自体损伤的一种现象，而是为更好地适应生存环境而主动争取的一种死亡过程。实验原理Hoechst 33258和Hoechst 33342均为非嵌入性荧光染料，它们在活细胞中DNA聚AT序列富集区域的小沟处与DNA结合。活细胞或固定细胞均可从低浓度溶液中摄取该染…

动物实验 ▏小鼠骨髓间充质干细胞成骨诱导分化

髓间充质干细胞是干细胞家族的重要成员，来源于发育早期的中胚层和外胚层，属于多能干细胞，间充质干细胞最初是在骨髓中被发现，因其具有多向分化潜能、来源广泛，获取简单，易于分离培养，体外增殖力强等特点而日益受到人们的关注。目前发现其具有能够分化形成至7种组织细胞，如成骨细胞、成脂细胞等组织细胞的潜能。可以为骨、肌肉等结缔组织的损伤修复提供潜在的细胞来源，被认为是骨组织工程中最佳的种子细胞。实验原理 间充质干细胞（MSC）是干细胞的一种,具有向多种类型细胞分化…

细胞增殖检测——EdU检测法

细胞增殖是生物体的重要生命特征，指细胞在周期调控因子的作用下，通过DNA复制等反应，完成细胞分裂的过程。增殖检测一般是分析分裂中细胞的数量变化，进而反映细胞的生长状态及活性，目前广泛应用于肿瘤生物学，分子生物学，药代动力学等领域。细胞增殖检测的方法众多，应用非常广泛，按检测原理主要分为4 类：检测DNA合成、检测代谢活性、检测细胞增殖相关抗原和检测ATP浓度。其中，细胞DNA合成检测是通过测定细胞的DNA合成量来评价细胞的增殖能力，直接测定DNA合成是检测细胞增殖最…

Western Blot—实验步骤及结果分析

原理 蛋白质印迹法 (WB) 是一种广泛使用的基于抗体的技术，借助抗体与目的蛋白（抗原）的特异性结合，检测细胞或组织提取物中的蛋白质表达水平。 实验流程图小编将详细介绍蛋白免疫印迹实验的步骤，并提供结果分析的指导，助大家更好的完成实验。实验步骤01样品制备蛋白免疫印迹实验的第一步是样品制备。通常，您可以从细胞培养物、动物组织或微生物培养物等样品中收集蛋白质。在此过程中，您需要避免蛋白质的降解和失活。以下是一般的样品制备步骤：a. 收集细胞或组织：使用适当的缓冲…

速看！ELISA实验遇到的常见问题及解决方法

ELISA实验对科研人员而言，如不注意实验操作过程中的各个环节，可能会出现白板，显色弱灵敏度低，花板无梯度背景高等现象，从而阻碍我们实验的快速推进。下面小编整理出ELISA实验操作时常会遇到的问题，大家快来围观吧。1ELISA实验结果空白背景高2假阳性多，本底高甚至花板。3ELISA实验结果无信号4ELISA实验结果整板读数偏低5ELISA实验结果标准曲线不佳/重复性差6ELISA实验结果整板呈规则黄色如有需要，请联系我们~主营项目1. 动物实验动物饲养、疾病造模、行为学检测、心功能、无创血…

实验动物小鼠——C57家族简介

C57小鼠的由来C57BL作为小鼠品系中广泛应用的代表，其名称中的BL源自英文Black，意指该品系小鼠以黑色外观显著区别于其他品系。C57BL涵盖多个科研常用的亚系，如C57L、C57BL/6、C57BL/10，其中C57BL/6尤为普遍，这些小鼠常被简称为黑鼠或黑色小鼠。但需注意的是，此类称呼易引起混淆：提及实验用黑小鼠时，虽常指C57BL/6，却非绝对。另外，C57BL/6亚系内还包含多种基因型小鼠，其命名习惯是在6后附加字母，例如C57BL/6J、C57BL/6N，因此仅凭黑色外观无法确定其具体基因型。值得注意的是…

重磅！国自然函评已经开始！

最近，有网友称2025 年国家自然科学基金函评已经开始，并提到今年的基金委方面有两大动态，一是评审将涉及 2/3 小同行，二是评审人员岁数超过 45 岁。目前尚不清楚发布此次信息的具体来源，不过可以确定的是，大家等待国自然项目结果的心，已经按捺不住了。根据国家自然科学基金委员会发布的《关于 2025 年度国家自然科学基金项目申请与结题等有关事项的通告》，自然科学基金委将于 2025 年 4 月 29 日前公布申请项目初审结果，并受理复审申请。并且按照以往，函评一般是在初审结果公布…

医学硕博论文撰写技巧大揭秘：掌握这些要点，毕业之路畅通无阻！

医学博士论文作为学术生涯的关键节点，不仅是研究者学术成果的集中体现，更是其创新能力的有力见证。论文撰写涉及多个复杂环节，任何一处的疏忽都可能导致研究方向的偏离或学术价值的折损。本文整合网络精华资源与丰富实践经验，将从文献收集起步，逐步深入到论文各部分的撰写要点，直至最终完稿，全方位为你剖析医学博士论文撰写的核心要素，助力你跨越毕业障碍，迈向学术新高度。PART 01文献收集与选题01文献收集策略入学伊始，一旦确定研究领域，文献收集与研读便成为首要且持续的任…

根据孔数、形状、处理方式、颜色选择细胞培养板的方法

细胞培养是一种基本的生命科学研究技术，已成为现代生物医学研究的重要手段。细胞培养板是细胞培养实验中常用和重要的实验室耗材，选择合适的细胞培养板对细胞的生长和实验结果的准确性有至关重要的影响。细胞培养板根据底部形状的不同可分为平底、圆底（U型）和V底（V型）；培养孔的孔数有6、12、24、48、96、384、1536孔等；表面处理方式有TC处理和超低吸附处理；颜色有透明色、白色、黑色等。那么如何从这么多的规格中选择适合实验的细胞培养板呢？1孔数的选择细胞培养板的孔数包含…

动物实验指南——大鼠ll型糖尿病（T2DM）模型构建

实验背景 糖尿病(diabetes mellitus，DM)是一类严重威胁人类身体健康的代谢性疾病。由于胰岛素分泌缺陷或作用障碍引起机体慢性血糖水平增高，导致糖类、蛋白质、脂肪等的代谢紊乱，继而引起肾脏、心脏等组织器官慢性损害。通过构建II型糖尿病(T2DM)动物模型，对研究T2DM的发生机理和临床防治十分重要。常见模型构建方法01高脂饲料诱导模型通过喂养大鼠或小鼠高脂肪饮食，诱导胰岛素抵抗和糖耐量异常，最终发展为Ⅱ型糖尿病02单一基因缺陷模型通过基因工程手段，敲除或过表达与糖代谢…

深扒细胞凋亡：8种细胞凋亡检测法的原理、优缺点

细胞凋亡（apoptosis）是指细胞在一定的生理或病理条件下，受内在遗传机制控制，按照自身程序主动性、生理性的死亡过程。细胞凋亡是细胞的一种基本生物学现象，在多细胞生物去除不需要的或异常的细胞中起着必要的作用。它在生物体的进化、内环境的稳定以及多个系统的发育中起着重要的作用。细胞凋亡不仅是一种特殊的细胞死亡类型，而且具有重要的生物学意义及复杂的分子生物学机制。No.1Annexin V-FITC/PI双染色法原理：利用Annexin V结合凋亡细胞外翻的磷脂酰丝氨酸（PS），FITC标记显…