文献解读┃姜宏景教授团队开展前瞻性研究：新辅助帕博利珠单抗联合化疗治疗可切除食管鳞状细胞癌的疗效探索

论文信息：标题：A prospective study of neoadjuvant pembrolizumab plus chemotherapy for resectable esophagealsquamous cell carcinoma: The Keystone-001 trial期刊：Cancer Cell影响因子：48.8作者：Xiaobin Shang, Yongjie Xie, Jinpu Yu3, Jun Yu, yujun, Jihui Hao, Haojihui, Hongjing Jiang发表日期：2024年10月doi: 10.1016/j.ccell.2024.09.008关键词：食管鳞状细胞癌; 免疫检查点抑制剂; 单细胞RNA测序; T细胞受体γ链恒定区2, 新辅助治疗实验设计总览01研究队列入组标…

科研干货分享 | 常见的Cre小鼠和flox小鼠是什么意思？

在生物医学研究中，Cre小鼠和flox小鼠是两种非常重要的基因工程工具鼠，广泛应用于基因功能研究、疾病模型构建等领域。它们通过Cre-loxP系统实现条件性基因操作，帮助科学家在特定组织或时间点精确调控基因表达。No.1Cre小鼠●定义：Cre小鼠是一种转基因小鼠，其基因组中插入了Cre重组酶基因。Cre重组酶可以识别并切割特定的DNA序列——loxP位点。●作用：Cre重组酶能够介导两个loxP位点之间的DNA重组，从而删除、倒位或插入特定的基因片段。●特点： • Cre表达可以由组织特异性启…

国自然热点剖析 | “肠道菌群”如何开展研究？

肠道菌群研究在2025年将继续成为生物医学研究的热点，特别是在国自然项目中。以下是一些关键的研究方向和方法，以及如何开展肠道菌群研究的建议：No.1 核心菌群特征的研究肠道菌群研究在2025年将继续成为生物医学研究的热点，特别是在国自然项目中。以下是一些关键的研究方向和方法，以及如何开展肠道菌群研究的建议：No.2肠道菌群与器官轴的深入研究肠道菌群通过多种渠道影响宿主的代谢和生理过程，包括通过肠菌影响脑、肾脏、肝脏和皮肤等器官。研究肠道菌群产生的小分子代谢物如何调…

"细胞-细胞间交互"三种常见作用方式和研究方法盘点，还不赶快收藏！

以外泌体（或者胞外囊泡）及其成分（如RNA、脂质和蛋白）、线粒体转移（比如隧道纳米管介导的）、配体-受体（比如膜配体、分泌性配体以及膜受体）为代表的“细胞-细胞间通讯（Cell-Cell Communication，CCC）”是很多研究团队关注的主题，也是这几年国自然项目和高分文章经常关注的领域。今天来盘点这三种作用方式的研究方法。 01外泌体介导的细胞间通讯外泌体是细胞分泌的纳米级囊泡，携带蛋白质、RNA等生物分子，通过与受体细胞融合或被内吞，传递信号调节其功能。研 究 方 法（1）外…

WB条带出现各种状况? 原因分析和解决方法在这里！

Western Blot虽是实验室最常用的蛋白分析技术，但是由于它步骤繁琐、操作流程长、影响因素多，所以，导致我们在做实验时会遇到各式各样的问题。今天我们总结了一些WB实验中经常遇到的各种“奇葩”条带问题，并为你推荐了常用的解决方法，希望对大家有所帮助。一、目标条带没有信号原因分析： 样品中可能含有蛋白酶，使蛋白样品分解成小分子。解决方法： 添加蛋白酶抑制剂。原因分析： 目标蛋白浓度过低（低于检测下线）。力 解决方法：加大上样量或提高目标蛋白浓度。 原因分析：…

动物实验 | 裸鼠成瘤实验反反复复？速看这个裸鼠成瘤小技巧，学会不再是难题！

裸鼠，也被称为无胸腺裸鼠，是一种先天性胸腺缺陷的突变小鼠，其形成源于第VIII连锁群内裸体位点基因的纯合。裸鼠在科学研究中展现出巨大的潜力，这主要归功于其nu基因独特的遗传特性。经过全球实验动物遗传育种学家的不懈努力，nu基因已被成功导入不同近交系动物中，从而创建了一系列动物模型。仅小鼠模型一种，就已建立了二十余种近交系裸鼠。这些裸鼠具有不同的遗传背景和nu基因的遗传特性，为医学生物学研究者提供了一种极其宝贵的试验材料。本文将重点探讨裸鼠的成瘤实验方法。常…

流式细胞术 ：当代最先进的细胞定量分析技术

流式细胞术 (Flow Cytometry, FCM) 是一种在液流中快速检测细胞特性的技术，是当代最先进的细胞定量分析技术之一。它通过将单个细胞与特异性抗体结合，对细胞进行多参数定量分析，包括细胞表面标记、细胞内蛋白质表达、细胞周期、DNA含量等。流式细胞术具有高通量、高灵敏度、高特异性等优点，广泛应用于免疫学、血液学、肿瘤学等领域。01流式细胞术原理一、分析型流式细胞仪检测原理将待测样品制成单细胞悬液，在鞘液的包裹下进入流式细胞仪内的检测区域，细胞在激光的照射下会发生散…

qPCR原理虽懂，但数据难分析，你真的会设计qPCR实验方案吗？

一、qPCR 实验前期筹备（一）RNA模板要求实验启动前，需确保RNA模板的纯度、浓度及完整性均符合标准，方可推进后续步骤。具体要求如下：①RNA需保持一级结构完好无损。②高纯度：无DNA、游离核苷酸等核酸杂质；无酶抑制性有机溶剂、金属离子及蛋白质、多糖、脂类等污染物。③足够浓度：需满足反转录实验的基本需求。（二）qPCR引物设计规范引物建议长度介于18~30个碱基；GC含量应控制在40%~60%之间；设计时应跨越内含子，避免内部出现互补序列。通常，引物终浓度设为0.2μM效果较佳；若…

国自然实验外包：有什么好处，选择与注意事项

现如今，众多科研人员已经认同实验外包这个行业，并融入其中，是国家鼓励资源合理利用的很好方向。国自然实验外包：有什么好处，选择与注意事项。一般事先跟你讲实验风险的，都是比较靠谱的公司，因为这些公司都曾经遇到过很多问题，知道你的实验哪里可能出现问题。如果满嘴跑火车，说实验肯定可以做好，这样的公司可能就是皮包公司，因为他不知道科研不是绝对的，不知道哪里可能出现问题。一定要与管实验的技术联系上，销售员、业务代表等都是不做实验的，实验做得好不好，是否及时都…

实验动物（小鼠与大鼠）的操作指南！

性别区分在实验操作中，准确区分小鼠和大鼠的性别至关重要。主要依据以下特征进行判断：1. 生殖器与肛门的距离：雄性小鼠和大鼠的生殖器与肛门距离较远，而雌性则较近。这一特征在幼龄仔鼠中尤为明显，因为此时它们的外生殖器尚未成熟。2. 毛发覆盖情况：雄性小鼠和大鼠在生殖器与肛门之间通常有毛发生长，形成一条明显的毛带；而雌性则无毛，呈现一条清晰的纵沟。3. 乳头的明显程度：雌性小鼠和大鼠的乳头相较于雄性更为突出和明显。4. 生殖器官特征：雄性阴茎朝向头部方向突出，可通…

细胞实验干货 | 常用的细胞活性检测方法有哪些？

在细胞实验研究中，验证细胞活性是至关重要的环节，它关乎着细胞在特定条件下（例如药物处理、放射性或紫外线照射、培养条件调整等）的生长状态。细胞活性不仅是评估细胞健康的关键指标，也是众多科研活动的基石。为此，活细胞分析技术日益凸显其重要性。细胞活性的检测方法众多，其中包括台盼蓝染色法、荧光染色法、克隆（集落）形成法、ATP含量测定法以及比色法等。以下是对几种常用方法的详细介绍：No.1染色计数法01化学染色法 化学染色法中的染色计数法是细胞培养实验中用于检查细…

实验动物知识 | 为什么6-8周的小鼠更受欢迎？

为何6-8周龄小鼠成为实验首选？做过小鼠实验的同学们或许都有这样的疑惑......以下是小鼠出生后至14天的日形态变化概览，可见小鼠惊人的生长速度，仅两周（14天）便已初具形态。与人类相比，小鼠的寿命仅为约24个月，相当于人类的全球平均寿命80岁。通过换算，我们得出小鼠生活1天约等于人类40天，即人类1年约等于小鼠9.125天（计算公式：(80岁×365天) ÷ (2年×365天)）。但需注意，小鼠与人类的成熟及衰老速率并不成线性比例，因此这种换算仅为大致对应，具体年龄关系更为复杂（参考…

我师姐一年6篇SCI，全靠这20个“宝藏网站”，太实用了

这20个宝藏网站，科研路上必备！精心筛选自100个科研资源，涵盖SCI文献检索、高效阅读、论文撰写、科研绘图等，让你一旦接触便难以割舍，科研之旅因此更加顺畅。请耐心阅读，尤其是末尾6款科研绘图神器，绝对不容错过。（阅读完毕别忘了收藏点赞哦，避免未来迷失方向）一、文献检索篇01 PubMed链接：https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/由美国国立医学图书馆NCBI打造，生物医学领域权威检索系统，收录自1966年起，70余国4000余种期刊文献，科研人必备。搭配Scholarscope、EasyPubMed等插…

细胞实验 | 细胞瞬时转染操作步骤及影响因素

细胞瞬时转染是一种常用的实验技术，用于将外源DNA或RNA导入细胞内，从而研究基因的表达、功能和调控机制。以下是细胞瞬时转染的一般步骤和注意事项。一、细胞瞬时转染的一般步骤01细胞培养 • 提前一天铺板，确保细胞均匀分布。转染前将细胞培养至70-80%的密度，以保证细胞处于活跃的生长状态。02转染试剂和质粒准备 • 根据转染试剂的说明书准备转染试剂和质粒DNA。转染试剂的用量通常根据细胞类型和转染效率来确定，一般为2-10μL/孔（对于24孔板）。质粒DNA的用量通常为…

免疫荧光染色之抗体挑选全攻略

免疫荧光染色技术依赖于抗原抗体相互作用的极高特异性。通过将不影响抗原抗体功能的荧光染料标记在抗体或抗原上，当标记的抗体与其对应的抗原特异性结合时，可在荧光显微镜下观测到一种特异的荧光信号，从而判定抗原的存在、散布和位置。今天，小编将与大家探讨免疫荧光染色中抗体的选择方法，希望能对大家有所帮助。免疫荧光染色一抗的挑选①依据样本挑选一抗一抗的物种来源应尽量避免与检测样本的物种相同，以防止二抗与样本内生的免疫球蛋白发生交叉反应。例如，若检测的是小鼠样本…

动物实验模型 | 糖尿病动物模型方法大汇总

糖尿病（diabetes mellitus, DM）已对全球人类健康构成重大威胁。DM及其并发症不仅显著降低患者生活质量，还是导致残疾和死亡的关键因素。因此，构建恰当的糖尿病动物模型，以深入探究DM及其并发症的发病机理，显得至关重要。当前，制备DM动物模型的主要方法包括：胰腺切除术、化学药物诱导、利用自发性糖尿病动物及转基因技术等。一、胰腺切除法制备DM模型常选用狗、猫及大鼠等动物，通过全部或近乎全部切除其胰腺（同时保留胰十二指肠动脉吻合弓）。若实验动物连续两日血糖浓度超过1…

技术贴 |毕业论文写作的方法与技巧

快毕业啦！！！大家论文都写了吗？科研论文是反映科研成果和科研能力的一类学术性文章。从研究背景对象，到提出问题、研究方法、得出的结论，以及作者综合实验数据和其他资料分析得出的新的见解。No.1写作步骤01 前期准备 （1）收集和筛选相关资料。要对阅读的文献进行区分，分为需要精读和泛读的文章。与自己研究主题密切相关的文献应当反复仔细阅读；与研究主题关联程度小的文章则彩英浏览和区别阅读的方法。还需注意年代，一般先了解3~5年内的文献。（2）充分了解相关研究背景后，根…

当审稿人要求补充实验，我们应该怎么办？

在SCI论文的评审流程中，审稿人提议增添实验数据是屡见不鲜的环节。面对这一情形，作者往往面临两种策略：实施额外实验或维持原状。这两种路径各有其利弊，需依据实验的可行性、研究的核心目标及论文的整体布局来谨慎抉择。01选择实施额外实验当审稿人建议增加实验时，其初衷往往在于通过更详尽的数据支撑或实验验证来提升研究的精确度和说服力。若你倾向于采纳此建议，需考量以下几个维度： • 实验结果的预期价值：额外实验的结果充满未知，但理想状况下，它能强化原有研究结论，为…

稳定细胞株筛选---抗生素如何选？

在生物医药领域，基因转染是一种常见的实验技术，用于将外源基因导入细胞中。然而，要想成功地进行稳定转染并筛选出阳性细胞株，选择合适的筛选抗生素至关重要。本文将详细介绍如何选择稳定转染的筛选抗生素。通常构建的载体上有两个抗性基因，如，氨苄青霉素（Amp）和、新霉素抗性基因(neo)。那么建立稳转细胞系时该用哪种抗生素来筛细胞呢？很多真核表达质粒上都有两个抗性基因，但一般其中只有一个抗性可以用来筛细胞。其中氨苄青霉素对细胞是没有筛选作用的，这是用于构建克隆时筛…

【科研干货】各类体外细胞实验合集详解！

体外细胞实验是我们开展课题研究及进行生物医药医学研究非常重要的途径。今天整理了多种体外细胞实验的干货共大家学习和参考：MPC5足细胞缺氧模型、脊索样细胞诱导分化成髓核样细胞、人诱导多功能干细胞(hiPSC)诱导分化成脊索样细胞、大鼠脂肪间充质干细胞成脂诱导模型、3T3-L1细胞成脂诱导模型、乳鼠二型肺泡上皮细胞(AECII)分离提取。LPS诱导细胞炎症模型1. 实验背景脂多糖(Lipopolysaccharide)(英文简写LPS)是革兰氏阴性细菌细胞壁外壁的组成成分，是由脂质和多糖构成的物质(糖脂质…