干货分享！一文教你如何区分转化、转导、转染、感染

亲爱的科研同仁们，今日我们来深入探讨生物医学领域里四个易混淆的概念：转化、转导、转染及感染。尽管它们听似相近，实则内涵及应用背景大相径庭。接下来，我将逐一剖析它们的差异。转化（Transformation）定义：于分子克隆领域，转化专指将质粒DNA或以其为载体的重组子直接引入细菌细胞的过程。分类：①染色体DNA转化：历经吸附、吸收、整合三阶段。DNA一旦被细胞摄取，即免受外源核酸酶分解。它初为双链，入胞后转单链，整合至细菌染色体。②质粒DNA转化：先以特定浓度钙离子预处理…

qPCR扩增曲线与Ct值解读

在荧光定量 PCR（qPCR）技术中，qPCR 扩增曲线与 Ct 值（或Cq值）是理解和分析实验结果的核心要素。它们就像一把钥匙，为我们解锁基因表达量的秘密，在生命科学研究和临床诊断等领域发挥着至关重要的作用。 qPCR通过荧光染料或探针与扩增的双链DNA结合，产生荧光信号。机器实时监测荧光信号变化，反映DNA扩增的数量。通过分析荧光信号的强度，可以定量分析样品中的目标基因。PCR指数扩增过程当中，产物量与循环数之间的关系是：扩增产物量f(x)=起始模板量S×（1+E）^循环个数n。2、…

想要做好动物实验，应提前了解好的相关问题

良好的动物实验设计对提高研究工作质量，所写的论文被高水平的杂志接受发表都非常重要。目前在生物医学研究领域的动物实验方面还存在不少低质量的研究工作，一方面是所用动物的质量不高，级别低给实验结果的科学性带来不小的影响，另一方面研究人员在实验设计和统计学分析方面的训练不足，也是导致研究工作质量低下的重要原因。一个好的动物实验设计，对统计学分析来说帮助很大，可以使问题变得更容易解决，而一个不正确的动物实验设计，可能使我们不能从实验结果中提炼出任何有用的信…

细胞如何“愈合”？一文详解细胞划痕实验全过程

今天聊下细胞划痕实验的操作及分析步骤，细胞划痕实验（Cell scratch assay），也被称作伤口愈合实验（Wound healing assay），是一种模拟体内伤口愈合过程的体外实验技术。这项技术通过在细胞单层上制造一个“划痕”或“伤口”，并记录细胞如何填补这一空白区域，来研究细胞的迁移行为、修复能力以及细胞间的相互作用。感兴趣的小伙伴可以留言交流，加V回复更快！实验步骤：1 先用marker笔在6孔板背后，用直尺比着均匀的划横线，间隔大约0.5-1cm，横穿过孔，每孔至少穿过5条线；2 消化…

速学！！！WB实验保姆级教程——实验流程和常见问题

WB实验保姆级教程WB（Western Blot，蛋白质印迹法）实验的原理是基于抗原-抗体特异性结合的特性来检测特定蛋白质。WB作为分子生物学中最常用的实验，包含了很多技巧与知识，想做出漂亮的WB检测结果不是一件易事。WB标准流程：样本制备→凝胶上样、电泳→转膜→封闭→抗体孵育→显影WB实验流程和结果解析#01实验前的准备实验开始前一定要做的事情，是对所研究的目的蛋白在待测样本中的表达水平、蛋白大小、翻译后修饰等背景信息进行深入的了解，同时也需要设置严格的阴性、阳性对照样本…

动物实验模型构建——切口疼痛模型

大小鼠切口疼痛模型是研究术后急性及慢性疼痛机制、评估镇痛药物效果的重要工具。以下是基于现有研究的详细总结：01常见切口疼痛模型类型1.足底切口模型· 模型特点：通过在大鼠或小鼠后肢足底制造标准化切口（通常长度1cm），模拟手术切口疼痛，引发机械痛超敏和自发痛行为。· 应用：主要用于研究急性术后疼痛及慢性术后疼痛（CPSP）的转化机制，如神经损伤和炎症反应。2.皮肤/肌肉切口牵拉模型（SMIR）· 模型特点：切开皮肤及肌肉后牵拉深层组织（如跖肌），模拟手术牵拉损伤，导致…

细胞成管实验总失败？这5个常见问题帮你轻松攻克！

胞成管实验（如Matrigel基质成管实验）在操作过程中常会遇到各种问题，影响实验结果的可重复性和准确性。以下是常见问题及其解决方法，供参考优化实验：一、细胞不成管或成管效果差可能原因：细胞状态不佳细胞传代次数过多（如HUVEC超过P8）、活力低或存在污染（如支原体）基质问题Matrigel未充分融化（需4℃过夜）、铺板不均匀或批次差异大培养条件不当血清浓度过高（抑制成管）、缺乏促血管生成因子（如VEGF、bFGF）接种密度不合适细胞过少无法形成网络，过多导致堆积解决方法：1.使…

国自然热点全家桶来咯！复旦大学团队：巨噬细胞+单细胞+脂代谢+免疫治疗，高分文章叠叠高！

又到一年国自然申请季，实验室的灯光常亮，科研人的发际线愈发靠后。传闻中，能否中标不仅靠学术实力，还要点“玄学加持”。但真正懂行的人都知道，国自然的关键是：抓热点、讲故事、拼创新。今年小编总结的热点中，有几个关键词特别“吸金”：巨噬细胞、单细胞技术、脂代谢与免疫治疗。它们像科研圈的“流量明星”，不仅各自精彩，还能“组团出道”。试想一下，把单细胞技术用在巨噬细胞上，探索它在脂代谢免疫调控中的“角色转变”，瞬间一篇国自然高分标书呼之欲出。这不禁让人感叹…

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【细胞实验干货】各类体外细胞实验合集详解！

体外细胞实验是我们开展课题研究及进行生物医药医学研究非常重要的途径，往期我们分享了很多关于细胞实验的干货：

手残党福音，小鼠心脏灌流实验全流程详解！

No.1实验原理小鼠心脏灌流实验，依托血液循环系统，向体循环注入固定液或生理盐水，以此清除血液并固定组织。该方法可有效消除血液对后续组织切片、免疫染色、基因测序等实验的干扰，同时维持组织的形态与结构完整性。No.2实验材料耗材：1mL 注射器、输液器针头、止血钳、镊子、剪刀、导管，以及眼科镊、精细剪等解剖工具。试剂：生理盐水、4% 多聚甲醛固定液、1.25% 三溴乙醇麻醉剂。设备：蠕动泵、解剖台。No.3实验步骤实验流程依次为：麻醉小鼠→固定小鼠→打开胸腔→生理盐水灌流→…

2025年3月国家自然科学基金医学领域动态！

根据2025年3月国家自然科学基金相关官方动态，以下总结当前对申报国自然具有重要参考价值的核心信息及政策调整：一、国家自然科学基金委员会全委会召开，明确2025年资助方向与改革重点1. 基础研究高质量发展战略在3月19日召开的第九届委员会第三次全体会议上，科技部部长阴和俊强调，2025年将强化基础研究的体系化布局，推动目标导向与自由探索“两条腿走路”，并试点非共识项目资助机制，支持高风险、原创性研究。2. 政策亮点：青年项目（A类）结题分级评价及延续资助机制，推动人才项…

2025国自然冲刺必备！大佬整理的Deepseek指令大全！终于求来了

一、国自然申请书撰写01选题方向“我的研究围绕[研究背景]展开，针对[现存问题]，希望能得到3个契合国家自然科学基金资助导向的研究方向推荐。要求如下：1.每个方向都要阐述与《国家自然科学基金“十四五”发展规划》的关联；2.标注近三年该方向立项数的增长率；3.给出学科交叉可能性的分析。02标题优化“依据您所推荐的[具体方向]，请生成5个申报标题。要求：需包含「突破」「机制」「交叉」等关键词；区分理论创新型（体现新模型或新规律）与技术应用型（突出新方法或新体系）；标题…

文献解读：AGEs/ROS/NLRP3炎症小体轴在糖尿病角膜伤口愈合延迟和神经再生受损中的作用

No.1标题解读标题明确指出了研究的核心内容：AGEs/ROS/NLRP3炎症小体轴在糖尿病角膜伤口愈合延迟和神经再生受损中的作用。标题中的关键词包括：AGEs（高级糖基化终末产物）：糖尿病中常见的代谢产物，与糖尿病并发症密切相关。ROS（活性氧）：氧化应激的主要介质，参与多种病理过程。NLRP3炎症小体：一种重要的炎症信号复合物，参与多种炎症反应。糖尿病角膜伤口愈合和神经再生：研究的最终目标是揭示糖尿病角膜病变的分子机制。标题简洁明了，直接点出了研究的核心机制和病理过程。No…

流式实验总做不好？这份「高频常见问题+解决思路」收好！

最近经常听到小伙伴们苦恼于流式结果不理想，这篇文章为大家总结了一系列流式实验常见问题，看完绝对可以有效避坑（建议存入收藏夹备用）！1. 无信号/荧光强度弱 ● 补偿问题多色流式配色很关键，低表达的抗原可以用相同荧光素的高表达抗原代替，或者使用补偿微球。● 用于检测的抗体不足一定要做抗体滴定，按照说明书的要求加抗体。● 无法接近细胞内靶标确定好抗原的表达位置，选择合适的染色方法和刺激方法。● 激光器未对齐做实验前一定要确保仪器没有问题。流式细胞仪是流式的三大…

如何选择鼠的给药途径？给药方法、剂量对比及注意事项

在实验动物研究中，不同的给药途径会影响药物的吸收、生物利用度和特定实验的适宜性,研究人员必须熟悉各种途径，才能以最佳的方式对动物进行给药，得到科学的，合理的实验结果，下面我们就来聊一聊常用鼠的给药途径。No.1皮下注射皮下注射给药:是将药液注入皮下结缔组织，经毛细血管、淋巴管吸收进入血液循环的方法。在生物医学研究中，皮下注射也是一种常见的给药方式。该技术通常用于皮肤较薄、皮下组织疏松且血管较少的部位，如颈背部、腋下或大腿内侧的皮肤。(建议常用部位是鼠两耳…

【细胞实验干货分享】细胞冻存与复苏常见问题及解决方法

细胞冻存和复苏是在细胞研究和生物医学领域中常见的实验技术，用于长期保存和重复使用细胞。细胞冻存与复苏常见问题1. 细胞存活率低：有时，在冷冻和复苏过程中，细胞的存活率可能会较低① 确保使用新鲜和健康的细胞进行冻存。② 控制好细胞密度，在适当范围内进行冷冻。③ 使用合适的冻存液和冷却速率。④ 在复苏过程中尽快进行快速复苏，并采用温和的解冻方法。2. 细胞冻存为什么要添加保护剂?细胞冻存是将细胞放在低温环境，减少细胞代谢，以便长期储存的一种技术，细胞在不加任何保…

动物实验【心血管疾病模型】心脏骤停动物模型构建

心脏骤停(cardiacarrest，CA)是指心脏射血功能的突然停止，导致脑血流突然中断，并伴有自主呼吸消失及丧失意识的临床急症。心脏骤停（CA）是指心脏射血功能的突然终止，导致心脏骤停的病理生理机制最常见的是心室颤动。而对于心脏骤停后心肺复苏（CPR）每延迟1min生存率将下降7％～10％。心脏骤停和心肺复苏是复杂的病理生理变化过程，许多发病机制尚不清楚。心脏骤停动物模型被用来研究心肺脑复苏过程中机体的病理生理变化，探索新的治疗方法和完善现有心肺复苏标准干涉方法，比如药物…

医学基金审核视角：基金申请常见问题分析与修改策略！

医学基金优化的三大铁律：1.临床问题科学化：从“治什么病”转向“为什么治不好”；2. 机制解析维度化：时空（单细胞/空间组学）+ 界面（微环境互作）+ 动态（实时成像）；3. 转化路径闭环化：基础发现→靶点验证→临床前模型→精准干预方案。4. 修改公式：（精准临床场景 × 多维机制解析） + （原创技术交叉） = 高竞争力医学基金题目俗套，没有创新问题：标题宽泛，缺乏学科深度与创新聚焦，如“肝癌耐药机制研究”。1. 修改建议：收敛靶点：聚焦特定分子/通路，如“基于LncRNA HOT…

单细胞自测数据+公共数据+多组学筛选关键基因，这个9分思路简直炸裂！

做基础研究的小伙伴有没有觉得实验思路好设计，但是如何筛选关键基因是个难题。今天看一篇，文章在筛选基因方面也做了大量分析，小伙伴们学会了，接着再做一篇基础研究，又是一篇sci到手。1. 文献简介Caveolin-1 identified as a key mediator of acute lung injuryusing bioinformatics and functional research发表年份：2022影响因子：9期刊名称：Cell Death & Disease2. 研究背景急性肺损伤(Acute Lung Injury, ALI)是一种严重的呼吸系统疾病，通常继发于全身炎症反应。发病突…