细胞实验 ▏细胞凋亡之Hoechst染色实验

细胞凋亡之Hoechst染色实验 细胞凋亡是指为维持内环境稳定，由基因控制的细胞自主的有序的死亡。细胞凋亡与细胞坏死不同，细胞凋亡不是一件被动的过程，而是主动过程，它涉及一系列基因的激活、表达以及调控等的作用，它并不是病理条件下，自体损伤的一种现象，而是为更好地适应生存环境而主动争取的一种死亡过程。实验原理Hoechst 33258和Hoechst 33342均为非嵌入性荧光染料，它们在活细胞中DNA聚AT序列富集区域的小沟处与DNA结合。活细胞或固定细胞均可从低浓度溶液中摄取该染…

动物实验 ▏小鼠骨髓间充质干细胞成骨诱导分化

髓间充质干细胞是干细胞家族的重要成员，来源于发育早期的中胚层和外胚层，属于多能干细胞，间充质干细胞最初是在骨髓中被发现，因其具有多向分化潜能、来源广泛，获取简单，易于分离培养，体外增殖力强等特点而日益受到人们的关注。目前发现其具有能够分化形成至7种组织细胞，如成骨细胞、成脂细胞等组织细胞的潜能。可以为骨、肌肉等结缔组织的损伤修复提供潜在的细胞来源，被认为是骨组织工程中最佳的种子细胞。实验原理 间充质干细胞（MSC）是干细胞的一种,具有向多种类型细胞分化…

细胞增殖检测——EdU检测法

细胞增殖是生物体的重要生命特征，指细胞在周期调控因子的作用下，通过DNA复制等反应，完成细胞分裂的过程。增殖检测一般是分析分裂中细胞的数量变化，进而反映细胞的生长状态及活性，目前广泛应用于肿瘤生物学，分子生物学，药代动力学等领域。细胞增殖检测的方法众多，应用非常广泛，按检测原理主要分为4 类：检测DNA合成、检测代谢活性、检测细胞增殖相关抗原和检测ATP浓度。其中，细胞DNA合成检测是通过测定细胞的DNA合成量来评价细胞的增殖能力，直接测定DNA合成是检测细胞增殖最…

Western Blot—实验步骤及结果分析

原理 蛋白质印迹法 (WB) 是一种广泛使用的基于抗体的技术，借助抗体与目的蛋白（抗原）的特异性结合，检测细胞或组织提取物中的蛋白质表达水平。 实验流程图小编将详细介绍蛋白免疫印迹实验的步骤，并提供结果分析的指导，助大家更好的完成实验。实验步骤01样品制备蛋白免疫印迹实验的第一步是样品制备。通常，您可以从细胞培养物、动物组织或微生物培养物等样品中收集蛋白质。在此过程中，您需要避免蛋白质的降解和失活。以下是一般的样品制备步骤：a. 收集细胞或组织：使用适当的缓冲…

速看！ELISA实验遇到的常见问题及解决方法

ELISA实验对科研人员而言，如不注意实验操作过程中的各个环节，可能会出现白板，显色弱灵敏度低，花板无梯度背景高等现象，从而阻碍我们实验的快速推进。下面小编整理出ELISA实验操作时常会遇到的问题，大家快来围观吧。1ELISA实验结果空白背景高2假阳性多，本底高甚至花板。3ELISA实验结果无信号4ELISA实验结果整板读数偏低5ELISA实验结果标准曲线不佳/重复性差6ELISA实验结果整板呈规则黄色如有需要，请联系我们~主营项目1. 动物实验动物饲养、疾病造模、行为学检测、心功能、无创血…

实验动物小鼠——C57家族简介

C57小鼠的由来C57BL作为小鼠品系中广泛应用的代表，其名称中的BL源自英文Black，意指该品系小鼠以黑色外观显著区别于其他品系。C57BL涵盖多个科研常用的亚系，如C57L、C57BL/6、C57BL/10，其中C57BL/6尤为普遍，这些小鼠常被简称为黑鼠或黑色小鼠。但需注意的是，此类称呼易引起混淆：提及实验用黑小鼠时，虽常指C57BL/6，却非绝对。另外，C57BL/6亚系内还包含多种基因型小鼠，其命名习惯是在6后附加字母，例如C57BL/6J、C57BL/6N，因此仅凭黑色外观无法确定其具体基因型。值得注意的是…

重磅！国自然函评已经开始！

最近，有网友称2025 年国家自然科学基金函评已经开始，并提到今年的基金委方面有两大动态，一是评审将涉及 2/3 小同行，二是评审人员岁数超过 45 岁。目前尚不清楚发布此次信息的具体来源，不过可以确定的是，大家等待国自然项目结果的心，已经按捺不住了。根据国家自然科学基金委员会发布的《关于 2025 年度国家自然科学基金项目申请与结题等有关事项的通告》，自然科学基金委将于 2025 年 4 月 29 日前公布申请项目初审结果，并受理复审申请。并且按照以往，函评一般是在初审结果公布…

医学硕博论文撰写技巧大揭秘：掌握这些要点，毕业之路畅通无阻！

医学博士论文作为学术生涯的关键节点，不仅是研究者学术成果的集中体现，更是其创新能力的有力见证。论文撰写涉及多个复杂环节，任何一处的疏忽都可能导致研究方向的偏离或学术价值的折损。本文整合网络精华资源与丰富实践经验，将从文献收集起步，逐步深入到论文各部分的撰写要点，直至最终完稿，全方位为你剖析医学博士论文撰写的核心要素，助力你跨越毕业障碍，迈向学术新高度。PART 01文献收集与选题01文献收集策略入学伊始，一旦确定研究领域，文献收集与研读便成为首要且持续的任…

根据孔数、形状、处理方式、颜色选择细胞培养板的方法

细胞培养是一种基本的生命科学研究技术，已成为现代生物医学研究的重要手段。细胞培养板是细胞培养实验中常用和重要的实验室耗材，选择合适的细胞培养板对细胞的生长和实验结果的准确性有至关重要的影响。细胞培养板根据底部形状的不同可分为平底、圆底（U型）和V底（V型）；培养孔的孔数有6、12、24、48、96、384、1536孔等；表面处理方式有TC处理和超低吸附处理；颜色有透明色、白色、黑色等。那么如何从这么多的规格中选择适合实验的细胞培养板呢？1孔数的选择细胞培养板的孔数包含…

动物实验指南——大鼠ll型糖尿病（T2DM）模型构建

实验背景 糖尿病(diabetes mellitus，DM)是一类严重威胁人类身体健康的代谢性疾病。由于胰岛素分泌缺陷或作用障碍引起机体慢性血糖水平增高，导致糖类、蛋白质、脂肪等的代谢紊乱，继而引起肾脏、心脏等组织器官慢性损害。通过构建II型糖尿病(T2DM)动物模型，对研究T2DM的发生机理和临床防治十分重要。常见模型构建方法01高脂饲料诱导模型通过喂养大鼠或小鼠高脂肪饮食，诱导胰岛素抵抗和糖耐量异常，最终发展为Ⅱ型糖尿病02单一基因缺陷模型通过基因工程手段，敲除或过表达与糖代谢…

深扒细胞凋亡：8种细胞凋亡检测法的原理、优缺点

细胞凋亡（apoptosis）是指细胞在一定的生理或病理条件下，受内在遗传机制控制，按照自身程序主动性、生理性的死亡过程。细胞凋亡是细胞的一种基本生物学现象，在多细胞生物去除不需要的或异常的细胞中起着必要的作用。它在生物体的进化、内环境的稳定以及多个系统的发育中起着重要的作用。细胞凋亡不仅是一种特殊的细胞死亡类型，而且具有重要的生物学意义及复杂的分子生物学机制。No.1Annexin V-FITC/PI双染色法原理：利用Annexin V结合凋亡细胞外翻的磷脂酰丝氨酸（PS），FITC标记显…

康旭禾生物，一站式科研实验外包解决方案

在流体力学科研进程中，实验环节不仅繁重耗时，更是推动研究进展的核心要素。面对种种棘手难题，科研人员往往倍感压力：✅ 想做实验，却没有现成设备平台？✅ 有平台，却不清楚如何设计方案？✅ 实验做完了，但数据不稳定，无法用于论文？✅ 实验进度一拖再拖，申报节奏全被打乱？我们深切洞察这些困境给科研人员带来的困扰与挑战。为此，我们精心组建了一支由行业资深专家构成的专业团队，致力于为高校及科研工作者量身定制流体力学实验整体解决方案，并提供全方位的外包服务。让您得…

科研干货！CCK8实验大总结：应用领域、实验原理、实验流程及操作要点

ell Counting Kit-8（简称CCK8）是一种基于WST-8的广泛应用于细胞增殖和细胞毒性的检测试剂。WST-8【化学名：2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯)-2H-四唑单钠盐】，是一种类似于MTT的化合物，它在电子载体1-甲氧基-5-甲基吩嗪鎓硫酸二甲酯（1-Methoxy PMS）存在的情况下，被线粒体中的脱氢酶还原为具有高度水溶性的橙黄色甲瓒产物（formazan）。细胞增殖越多越快，颜色越深；细胞毒性越大，则颜色越浅，对于同样的细胞，颜色的深浅与活细胞的数量成正比，因此可…

2025年度省自然科学基金项目申请常见问答

主营项目1. 动物实验动物饲养、疾病造模、行为学检测、心功能、无创血压、血常规、全自动生化检测等2. 细胞实验CCK8/MTT、原代细胞分离、流式细胞实验、细胞划痕、侵袭、迁移、EDU染色、转染、稳定株3. 分子生物学PCR检测、荧光定量PCR、绝对定量PCR、端粒酶长度、pull down、双荧光素酶、SSR、SNP检测等4. 蛋白实验WB、Co-IP、酵母双杂5. 病理实验HE染色、免疫组学、电镜6. 生理生化实验肝肾功能、抗氧化、免疫反应等生理免疫指标;动植物营养指标、微量元素、重金属、酶活等。7. 多组…

【动物实验】不同血友病模型对比及案例分析！

模型差异总结模型优缺点与应用场景模型构建案例1. 实验方法① 基因敲除（Knockout）技术：CRISPR/Cas9或同源重组靶向删除特定外显子（如F8 exon 16/17）。应用：小鼠血友病A/B型。② 转基因（Transgenic）技术：显微注射人类突变基因（如R539C、HLAD28/1*1501）至胚胎干细胞或受精卵。应用：模拟人类错义突变。③ 敲入（Knock-in）技术：靶向插入特定突变（如R33Q、G581E）至内源基因位点，保留表达框架。应用：研究CRM+/-表型。④ 自然突变模型技术：筛选自然发生的突变个体（如犬外显…

单细胞必学！一文带你读懂单细胞转录组数据分析

单细胞转录组测序近几年相当热门，这个技术能让我们获取每个测得细胞的转录组信息，但问题是单细胞测序相当大的数据量给后续的数据分析带来了不少挑战。单细胞转录组数据分析的难点主要在于细胞的质量不确定，细胞的数量大，从单细胞测序技术诞生至今，测到的细胞通量越来越高，现在一次单细胞转录组测到的细胞数可达100K~200K[1]。因而，对分析人员的要求也越来越高。虽然单细胞转录组的分析不容易，但依然是有清晰的流程哒（见下图）:接下来我们一起看看，每一步都需要做些啥。01测序…

细胞转染与实验常见问题解决方法

在进行基因的功能研究时，主要策略有两个，一个是过表达，一个是做敲除或做干扰。在此过程中，细胞转染是很常规的操作，但是有时会遇到转染效率低，导致实验无法推进。今天我们分享下细胞转染过程的几个注意事项。1. 关于启动子的选择。 启动子对于细胞转染效率有很大的影响。通常情况下，过表达质粒选择广谱强启动子CMV，干扰质粒选择U6或H1作为启动子（见下图）。在特殊情况下，对于特异性细胞的转染或感染，需要考虑用特异启动子，比如心肌细胞特异启动子cTNT，肝脏特异启动子TBG，…

动物实验 ▏常见小鼠肿瘤转移模型，看这篇就够了

肿瘤是当前世界上危害人类生命健康的重要疾病之一。但超过90%的癌症患者的相关死亡是由肿瘤转移引起的，而非原发肿瘤，且转移性癌症患者的5年生存率明显低于局限性癌症患。因此，肿瘤转移无疑成为了肿瘤课题研究的重要方向。建立合适的肿瘤转移动物模型对模拟临床中人体肿瘤转移过程和研究癌症的发病机制都有重要意义。01肿瘤转移过程肿瘤转移是一个动态的、多方面的过程，在此过程中，正常细胞转变为致癌细胞，这些细胞不受控制地增殖，逃避免疫系统，对程序性细胞死亡产生抗性，刺激…

【关注】全民“体重管理”，2026年国自然Top级热点“脂代谢”方向热门思路看过来！

乘着全国两会的东风，“体重管理”一夜之间成为时下热议的健康话题。国家扶持，申基不愁！小编大胆推测，脂代谢这个热点方向将成为明年国自然的一大热门。脂代谢研究可以如何开展呢？以下几个方面大家可以考虑哦：1、脂质合成与降解的分子机制研究关键酶和信号通路在脂质合成中的作用，例如二酰甘油酰基转移酶（DGAT）在甘油三酯合成中的角色。2、脂代谢与疾病的关系探讨脂代谢异常与疾病如肥胖、糖尿病、心血管疾病等之间的关系。3、细胞信号传导与脂代谢探索细胞内外信号分子如何调控…

【文献读图】一文读懂生存曲线！

作为一名要经常接触动物试验的生物医学科研人，不免会遇到需要通过动物试验来探究某种治疗方法效果的时候。此时，就需要通过绘制【生存曲线】来更直观地表达和评估不同方法的疗效对比。今天这期，就快快跟着小编来一起学习怎么看懂【生存曲线】图中各项数值的意义吧~导读1.生存曲线的定义&用途2.生存曲线怎么看（案例解读）3.生存曲线相关疑问&解答01生存曲线的定义&用途定义生存曲线用于描述研究群体的生存时间，能够让研究者直观地了解患者在一定时间内的生存概率，评估…