实验动物造模手册，科研人员的必备指南

一、动物实验基本方法指南1、动物实验给药剂量计算方法2、动物实验常用给药方式1、皮下注射。捏起皮肤，刺入针头，固定后即可注射2、皮内注射。剪掉注射部位动物毛发，消毒，用皮试针头紧贴皮肤表层刺入皮内，针头上挑再稍刺入3、肌肉注射。适合不溶于水而混悬状态的药物。选择肌肉发达、无大血管经过的部位，如臀部4、腹腔注射。腹部消毒，在左或右侧腹部将针头刺入皮下，沿皮下向前推进0.5CM，针头与皮肤45度角方向穿过腹肌刺入腹腔，此时应有落空感，回抽无肠液、尿液后，缓缓推入药…

干货分享丨细胞培养简单攻略-复苏/传代/冻存

细胞培养是指将细胞从动物或植物体内取出，然后在适宜的人工环境中生长的过程。细胞可以在培养前直接从组织中取出并通过酶或机械方法进行解离，也可以来源于已建立的细胞系或细胞株。细胞培养又具体分为细胞传代、换液、冻存、复苏等一系列过程，每个步骤都对应着不同的操作技术要点，想要养好细胞，每一步都必须掌握。1. 细胞复苏细胞复苏是指将休眠的细胞重新活化，使之重新生长，分裂产生子细胞的过程。复苏后的细胞可重新进入细胞周期，获得细胞类型特异的生物学功能。复苏细胞一般…

文献解读 | 新型化合物9d或成对抗化疗肾损伤的“护肾卫士”

化疗药物顺铂虽能有效抗击癌症，却常导致急性肾损伤（AKI），这一副作用让许多患者治疗陷入两难。近日，安徽医科大学团队在《Bioorganic Chemistry》发表重磅研究，宣布成功合成一种新型丙烯酰胺化合物9d，能通过阻断关键炎症通路，显著保护肾脏功能，为癌症患者带来曙光。为何顺铂会伤肾？科学家的破题思路化合物9d的三大“护肾绝招”01强力抗炎在细胞实验中，9d抑制炎症因子NO的能力是天然成分白藜芦醇的7倍以上（IC50=1.80 μM vs 13.14 μM），并显著降低IL-6、TNF-α等炎症因子水…

国自然热点接踵而来：铜死亡新起！细胞也怕重金属？一探铜死亡的奇妙世界！

在国家自然科学基金的热点研究中，铜死亡已经成为一个引人注目的焦点。研究表明，通过精确调控铜离子的浓度，我们可以诱导癌细胞发生铜死亡，从而在不伤害正常细胞的情况下，实现对癌症的精准打击。铜死亡，是细胞被铜“玩坏”了的一种独特死亡方式。想象一下，细胞好好地生活着，结果突然被铜离子“灌醉”，开始走向“生命的深渊”。科学家们最近发现，铜不仅仅用来制电线、做艺术品，还是细胞的“致命毒药”！而且更有趣的是，癌细胞对铜有种特别的“迷恋”，简直像细胞界的铜控。所…

动物实验 ▏糖尿病动物模型构建方法

前言糖尿病（Diabetes mellitus,DM）是胰岛素抵抗和胰岛素缺乏导致的以高血糖为主要特征的代谢絮乱综合征，易发生心、脑、肾等并发症，典型病例出现多尿、多饮、多食、消瘦等表现，即“三多一少”症状。其发病机理复杂，至今尚未完全阐明，目前还没有根治方法，因此，建立和选择适当的糖尿病动物模型对于糖尿病致病因素的研究以及糖尿病药物筛选、疗效研究等十分重要。一、自发性动物模型自发性糖尿病动物模型是指动物未经过任何有意识的人工处置，在自然情况下发生糖尿病的动物模型。…

单细胞干货分享系列，单细胞可以怎么用？满满测序、生信分析思路干货，走过路过不要错过

单细胞作为高分文章的主流、国自然的常青树，2023年发文1万+，2024才过半已经发文7700多篇，这么大的发文量也能印证单细胞的高热度和高成文能力，并且单细胞的应用现在也更多样化：经费充足的可以用大样本量单细胞测序冲击高分，没有实验条件的可以挖掘公共数据做单细胞分析，想用单细胞撑一下门面提高点创新性的还能利用一些单细胞数据库做些简单分析，淡妆浓抹总相宜，单细胞怎么用都可以出彩！所以这次小编准备给朋友们整理一些单细胞的思路干货，第一篇先来具体说说单细胞可以怎么…

高效科研第一步：LB 培养基配制全攻略与避雷指南

LB培养基（Luria-Bertani培养基，也称为Lysogeny Broth）是一种广泛应用于微生物学和分子生物学实验室的液体或固体培养基，主要用于培养大肠杆菌（*Escherichia coli*）等细菌。它的配方简单、营养丰富，能够支持多种细菌的快速生长。No.1主要成分LB培养基的经典配方包含以下三种核心成分：1. 胰蛋白胨（Tryptone）：10 g/L 提供氮源、氨基酸和小肽，是细菌生长的主要营养来源。2. 酵母提取物（Yeast Extract）：5 g/L 提供维生素、核苷酸和其他生长因子。3. 氯化钠（NaCl）：10 g/L…

动物实验| 大鼠脑中动脉缺血再灌注模型构建方法分享

缺血性脑卒中是一种严重的神经系统疾病，其中组织损伤是导致死亡的主要原因。近年来的研究表明，缺血后的再灌注过程中产生的过量氧自由基在组织损伤中起着关键作用。因此，研究脑缺血再灌注损伤的作用机制已成为全球科学界的关注焦点。在众多研究方法中，线栓法因其操作简便、无需开颅、无需呼吸机辅助等优点，成为构建脑局部缺血再灌注损伤模型的首选方法。该方法能够精确控制缺血及再灌注的时间，并且对局部条件的控制较为容易，对全身的影响较小，是制作脑局部缺血再灌注损伤模型的…

文献解读 | 肝癌治疗新曙光：基于二硫键死亡相关长非编码RNA的预后标志物研究

近期，一项发表于《Frontiers in Immunology》的研究成果，为肝细胞癌（Hepatocellular Carcinoma, HCC）的治疗带来了新的希望。该研究由浙江大学医学院附属邵逸夫医院的Haishui Zheng团队完成，题为“A disulfidptosis-related lncRNA signature for analyzing tumor microenvironment and clinical prognosis in hepatocellular carcinoma”，揭示了二硫键死亡（disulfidptosis）相关长非编码RNA（lncRNA）在HCC中的预后价值及潜在治疗机制。No.1研究背景肝细胞癌（HCC）是全球第六大…

操作不熟？教你流式细胞术实验从入门到精通！

流式细胞仪通常配有多个激光器，它们产生特定波长的光。由于每种荧光染料发出的光通常结合长通或短通滤光片被带通滤光片过滤，故流式细胞仪只检测特定波长范围内的荧光。在选择荧光染料时，请确认仪器带有能够激发目标荧光染料的激光器，以及能够检测该染料发射光的滤光片组合。抗体选择/多色组合设计一般来说，在同一样品上使用的荧光染料越多，从该样品中收集到的信息也越多。在单个样品上组合使用多种荧光染料时，设计需要遵循以下几点基本建议：<10种颜色1.抗原密度*应该与荧光…

【医学】2025年国自然热点：这些关键词将引领科研新潮流！

国自然基金一直是医学科研领域的风向标，其资助方向不仅反映了当前医学研究的前沿热点，也为科研人员提供了重要的研究思路和方向。2025年，国自然医学领域又将迎来哪些新热点？如何抓住这些热点提升立项成功率？本文为你一探究竟！2025年国自然医学领域五大热点关键词01免疫调控：巨噬细胞与T细胞的“战场”免疫学一直是国自然资助的重点领域，2024年相关项目中标数遥遥领先，预计2025年将继续成为热门方向。研究重点包括巨噬细胞、T细胞、免疫记忆以及肿瘤免疫治疗。这些方向不仅在基…

细胞培养全攻略：从入门到精通，一篇搞定所有关键技巧！

细胞培养是生物医学研究的核心技术之一，广泛应用于药物筛选、基因功能研究、疾病模型构建等领域。然而，细胞培养看似简单，实则暗藏许多“坑”。本文将为你详细解析细胞培养的全流程，从基础操作到高级技巧，助你轻松掌握细胞培养的奥秘！细胞培养的基础知识01细胞类型●原代细胞：直接从组织中分离，生物学特性接近体内状态，但寿命有限。●细胞系：经过永生化处理，可无限传代，但可能发生遗传变异。●干细胞：具有自我更新和分化潜能，常用于再生医学研究。02培养条件●培养基：常…

动物试验研究方案设计，具体应考虑哪些因素？

众所周知，无论是在科研课题设计，还是在药物临床前实验阶段，动物实验都扮演者重要的角色，通过动物实验我们能够：1. 确定潜在的作用靶器官和治疗作用出现的时间、性质、程度及其可逆性；2. 确定临床监测的指标和安全性参数；3. 便于探究疾病潜在作用机制和相关信号通路。它的完整性、合理性、论证性直接决定着这个课题或者这个项目的水平。也就是说，在实验开始之前，必须把所有细枝末节给想清楚（万一没整明白，杂志编辑又要你补，就该傻眼了），这里可以让动物实验经验丰富的师兄师…

DeepSeek文献“瞎编”？用这个方法，秒懂如何有效阻止错误生成！

目前，大家在使用问答大模型如DeepSeek、Chatgpt等来写论文时，会发现插入的参考文献打不开或根本不存在的情况；另外DeepSeek、Chatgpt扩写的内容如一些流行病学数据无法给出准确的“出处”，这对于严谨的科研写作来说显然是不够的。那么，对于这种情况，我们该如何应对呢？01痛点观察大语言模型的固有缺陷主要体现在以下几个方面：（1）对于未接入专业文献数据库的模型而言，其文献生成过程存在显著的不确定性，类似于"随机抽选"的结果，难以保证内容的准确性和可靠性。（2…

一文了解什么是免疫共沉淀（Co-IP）实验

引言：为什么Co-IP是研究蛋白相互作用的“黄金标准”？在生命科学领域，蛋白质之间的相互作用是调控细胞功能的核心机制之一。无论是信号通路的激活、疾病的发生，还是药物的作用靶点，都离不开蛋白质的“社交网络”。而免疫共沉淀（Co-IP）作为研究蛋白相互作用的经典技术，凭借其高特异性和直观性，成为实验室的必备技能。但很多新手对Co-IP实验充满疑问：•为什么明明做了实验，却检测不到目标蛋白？•对照实验到底怎么做才能避免“假阳性”？•如何从一堆复杂的步骤中抓住关键点？本…

文献解读┃Nature Communications：揭示 SH3RF3 促进乳腺癌干细胞特性的机制

01论文基本信息 标题：SH3RF3 promotes breast cancer stem-like properties via JNK activation and PTX3 upregulation期刊：Nature Communications影响因子：17.69作者：Peiyuan Zhang, Yingjie Liu, Cheng Lian 等发表日期：2020 年 5 月 19 日DOI：10.1038/s41467-020-16051-9关键词：乳腺癌干细胞；SH3RF3；JNK 通路；PTX302研究背景 癌症严重威胁人类健康，肿瘤异质性使得癌症治疗面临挑战，癌症干细胞（CSCs）理论为解释肿瘤异质性提供了思路。乳腺癌干细胞（BCSCs）在乳腺癌的…

2025年国自然申报即将启动，这三个必追热点你要知道！

2024年国家自然科学基金的评审结果一经公布，多个类别的项目资助率都呈现出持续下降的趋势，面上项目和青年基金的批准率分别为 11.66% 和 15.54%。创下近几年新低，不少科研人危机感十足，生怕今年竞争更加激烈。但就目前国自然基金委做出的几大改革来看，2025年应该会持续扩大资助量，“2024是国自然史上最卷的一年，但也可能是未来很长一段时间里最容易的一年”，类似的论调也被传得沸沸扬扬。那么，2025国自然，该如果申报才能提升获批几率呢？2025年国家自然科学基金（NSFC）申报本…

动物行为学 ▏小鼠焦虑行为实验怎么做？高架十字迷宫案例操作来啦~

研究小鼠焦虑行为的方法有很多，其中行为学实验之高架十字迷宫任务是一种评估啮齿动物类焦虑行为比较经典的一种方法。该测试是在具有两个张开和两个闭合臂的加号形装置上进行的，正式实验开始时，允许动物自由探索迷宫5分钟，同时记录进入张开和闭合臂的持续时间和频率。该任务基于一种接近—回避冲突，这意味着该动物面临着探索新环境的倾向与对高处和开放空间的无条件恐惧之间的斗争。因此，与对照动物相比，类似焦虑状态的特征是张开臂回避增加。设施准备1.高架十字迷宫2.工业相机（…

科研干货分享：12种常见的文献数据图解析

1、免疫荧光图怎么看？ 结果解读：免疫荧光图通过特定标记物的染色来观察细胞类型的分布和密度。例如，在实验中，使用TAM标记物Iba1进行免疫荧光染色，发现敲低WISP1基因能显著降低胶质瘤干细胞(GSC)来源的异种移植物中TAM的密度，这表明WISP1在肿瘤微环境中对TAM含量的调节作用。2、细胞凋亡流式图怎么看？ 结果解读：细胞凋亡流式图通过流式细胞仪检测细胞凋亡的标记物，如Annexin V和PI（碘化丙啶）的染色，来评估细胞凋亡的比例和阶段。3、UMAP图怎么看？ 案例解读：UMAP（U…

细胞实验技能 | CCK-8实验最全操作步骤以及注意事项

CCK-8是一种在细胞生物学实验中广泛应用的试剂，用于检测细胞增殖和细胞毒性。它可以直接添加到细胞样品中，无需预先配制各种成分。细胞增殖越快，颜色越深，表明毒性较小；而细胞毒性越大，则颜色越浅。对于相同的细胞类型，颜色的深浅（即生成的formazan的量）与细胞数量呈线性关系。实验材料及试剂：细胞96孔细胞培养板CO2培养箱酒精灯微量移液器酶标仪CCK-8试剂盒等实验步骤：1、取生长状态良好的细胞，制备成一定浓度的细胞悬液。每孔加入100μl至96孔细胞培养板中。通常，细胞增…