在荧光定量 PCR（qPCR）技术中，qPCR 扩增曲线与 Ct 值（或Cq值）是理解和分析实验结果的核心要素。它们就像一把钥匙，为我们解锁基因表达量的秘密，在生命科学研究和临床诊断等领域发挥着至关重要的作用。   

  qPCR通过荧光染料或探针与扩增的双链DNA结合，产生荧光信号。机器实时监测荧光信号变化，反映DNA扩增的数量。通过分析荧光信号的强度，可以定量分析样品中的目标基因。PCR指数扩增过程当中，产物量与循环数之间的关系是：扩增产物量f(x)=起始模板量S×（1+E）^循环个数n。

2、什么是扩增曲线

定义：扩增曲线是描述PCR动态进程的曲线，以循环数为横坐标，以反应过程中实时荧光信号强度为纵坐标。扩增曲线可以分成四个时期：基线期，指数期，线性期，平台期。

扩增曲线常以线性图谱和对数图谱两种形式展现。

线性图谱：以 PCR 循环数为横坐标，荧光信号强度为纵坐标，直接呈现荧光信号随循环数增加的变化情况。

对数图谱：以 PCR 循环数为横坐标，荧光信号强度的对数为纵坐标，突出指数增长期的特征，此阶段曲线会呈现为一条直线。  

对数图谱  

线性图谱

2、什么是CT值（Cq值）

 定义： PCR扩增过程中，扩增产物的荧光信号达到设定的荧光阈值时的所对应的扩增循环数（Cycle Threshold）。C代表Cycle，T代表Threshold。

阈值（threshold）：在扩增曲线的指数增长区域内，选择任意适当位置设定的荧光检出界限。

荧光阈值一般由仪器自动设置，也可以手动设置。荧光域值阈值线的缺省设置通常是PCR扩增前3-15个循环的荧光信号标准偏差的10倍。

同一次反应中对于不同的基因可单独设置阈值，但对于同一个基因扩增一定要设置相同的阈值。

3、为什么要有CT值
   3.1Ct值具有重现性：同一模板不同时间扩增或同一时间不同管内扩增，得到的Ct值是恒定的。

注：模板为10^5k拷贝GAPDH，用GAPDH引物扩增。96个孔重复结果的Ct平均值为19.1，变异系数（Cv）=0.002.   3.2Ct值与起始模板的线性关系：由于Ct值与起始模板的对数存在线性关系，可利用标准曲线对未知样品进行定量测定。

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CCK8/MTT、原代细胞分离、流式细胞实验、细胞划痕、侵袭、迁移、EDU染色、转染、稳定株

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PCR检测、荧光定量PCR、绝对定量PCR、端粒酶长度、pull down、双荧光素酶、SSR、SNP检测等

4. 蛋白实验

WB、Co-IP、酵母双杂

5. 病理实验

HE染色、免疫组学、电镜

6. 生理生化实验

肝肾功能、抗氧化、免疫反应等生理免疫指标;动植物营养指标、微量元素、重金属、酶活等。

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