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动物实验 ▏小鼠T淋巴细胞 CTLL-2 培养攻略

浏览:113 发表时间:2025-08-26

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小鼠T淋巴细胞 CTLL-2

细胞名称:CTLL-2

中文名称:小鼠T淋巴细胞

种属来源:小鼠

组织来源:T细胞

细胞形态:淋巴母细胞样

生长特性:悬浮生长


培养条件:


气相:95%空气,5%二氧化碳

温度:37℃


培养基与添加物:


基础培养基:RPMI-1640

添加物:10%特级胎牛血清(FBS)、100U/ml(或100IU/ml)IL-2、1%青霉素/链霉素(P/S)

注意,有些培养体系可能略有不同,但核心成分通常包括RPMI-1640、FBS和IL-2。


细胞培养步骤


1. 细胞复苏

①从液氮罐或-80℃冰箱中取出冻存管,迅速放入37℃水浴中摇晃解冻。

②将解冻后的细胞悬液移至含5ml完全培养基的离心管中,1000rpm离心5min。

③弃去上清液,补加5mL完全培养基后吹匀,接种于T25培养瓶中(或6cm皿中),培养过夜。

④第二天换液并检查细胞密度。


2. 细胞传代

①当细胞密度达到80%-90%时,进行传代培养。

②离心收集细胞(1000rpm,5-8min),弃去上清液。

③补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2的比例分到新的含5-6mL完全培养基的T25培养瓶中或6cm培养皿中。

④对于较难培养的细胞或新手,可采用竖瓶培养法,逐步补加完全培养基,待细胞密度升高后再进行传代。


3. 细胞冻存

①选择生长状态良好的细胞进行冻存。

②离心收集细胞(1000rpm,5-8min),去除上清液。

③按冻存数量加入无血清细胞冻存液,轻轻混匀后,分装入冻存管中(每管约1mL细胞悬液)。

④将冻存管放入-80℃冰箱中过夜,然后转入液氮罐中储存。


培养注意事项


1.细胞接收与检查:收到细胞后,首先检查细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象。若有异常,请及时与我司(恒远生物)联系。

2.无菌操作:在细胞培养过程中,应严格遵守无菌操作规程,避免细胞污染。

3.细胞密度监控:定期观察细胞生长情况,及时传代以避免细胞密度过高导致死亡。

4.培养基更换:根据细胞生长情况和培养基颜色变化,适时更换新鲜培养基。


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主营项目


1. 动物实验

动物饲养、疾病造模、行为学检测、心功能、无创血压、血常规、全自动生化检测等


2. 细胞实验

CCK8/MTT、原代细胞分离、流式细胞实验、细胞划痕、侵袭、迁移、EDU染色、转染、稳定株


3. 分子生物学

PCR检测、荧光定量PCR、绝对定量PCR、端粒酶长度、pull down、双荧光素酶、SSR、SNP检测等


4. 蛋白实验

WB、Co-IP、酵母双杂


5. 病理实验

HE染色、免疫组学、电镜


6. 生理生化实验

肝肾功能、抗氧化、免疫反应等生理免疫指标;动植物营养指标、微量元素、重金属、酶活等。


7. 多组学实验

基因组、转录调控、蛋白组、代谢组、微生物多样性、宏基因组、生信分析


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