细胞凋亡之Hoechst染色实验       

 细胞凋亡是指为维持内环境稳定，由基因控制的细胞自主的有序的死亡。细胞凋亡与细胞坏死不同，细胞凋亡不是一件被动的过程，而是主动过程，它涉及一系列基因的激活、表达以及调控等的作用，它并不是病理条件下，自体损伤的一种现象，而是为更好地适应生存环境而主动争取的一种死亡过程。

实验原理

Hoechst 33258和Hoechst 33342均为非嵌入性荧光染料，它们在活细胞中DNA聚AT序列富集区域的小沟处与DNA结合。活细胞或固定细胞均可从低浓度溶液中摄取该染料，从而使细胞核着色，故又把此类染料称为DNA探针。Hoechst 33342和Hoechst 33258均可溶于水并在水溶液中保持稳定。Hoechst-DNA的激发和发射波长分别550 nm和460 nm。在荧光显微镜紫外光激发时，Hoechst-DNA发出亮蓝色荧光。Hoechst染色是荧光染色中的一种类型，专门用来在荧光显微观察下标示DNA，由于可将DNA标示，此种染色方式也可以用来辨识内含DNA的细胞核及线粒体的位置。

实验步骤‍

（1）取处理后的各组样本，加入1 mL 4％多聚甲醛室温固定20 min，弃去固定液，加入1 mL PBS清洗两次，每次3 min，弃去PBS；

（2）加入1 mL Hoechst 33258染色液，室温染色5 min；

（3）弃掉染色液用PBS清洗五遍，每次3 min，最后加入1 mL PBS；

（4）荧光显微镜下观察并拍照。

凋亡的细胞核染色增强，荧光更为明亮，呈圆状或固缩状、团块状结构。非凋亡细胞核呈荧光深浅不一的结构样特征。二者形态相异，易区分辨别。

注意事项

Hoechst染色液需避光保存。

加入工作液后尽量当天完成拍摄避免染料淬灭影响。

如有需要，请联系我们~

主营项目

1. 动物实验

动物饲养、疾病造模、行为学检测、心功能、无创血压、血常规、全自动生化检测等

2. 细胞实验

CCK8/MTT、原代细胞分离、流式细胞实验、细胞划痕、侵袭、迁移、EDU染色、转染、稳定株

3. 分子生物学

PCR检测、荧光定量PCR、绝对定量PCR、端粒酶长度、pull down、双荧光素酶、SSR、SNP检测等

4. 蛋白实验

WB、Co-IP、酵母双杂

5. 病理实验

HE染色、免疫组学、电镜

6. 生理生化实验

肝肾功能、抗氧化、免疫反应等生理免疫指标;动植物营养指标、微量元素、重金属、酶活等。

7. 多组学实验

基因组、转录调控、蛋白组、代谢组、微生物多样性、宏基因组、生信分析

8. 整体课题实验

方案设计、整体实验交付、标书写作、论文润色、协助投稿

联系我们

康旭禾生物提供包括动物实验、细胞实验、分子实验、病理实验、流式检测实验及论文翻译、润色、投稿辅助等相关的各项服务。

联系方式：15579126092      

公司官网：http://consurebio.com/

公司地址：江西省南昌市南昌县小蓝VR产业基地D座2楼