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高效科研第一步:LB 培养基配制全攻略与避雷指南

浏览:323 发表时间:2025-07-22

LB培养基(Luria-Bertani培养基,也称为Lysogeny Broth)是一种广泛应用于微生物学和分子生物学实验室的液体或固体培养基,主要用于培养大肠杆菌(*Escherichia coli*)等细菌。它的配方简单、营养丰富,能够支持多种细菌的快速生长。


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No.1主要成分


LB培养基的经典配方包含以下三种核心成分:

1. 胰蛋白胨(Tryptone):10 g/L  提供氮源、氨基酸和小肽,是细菌生长的主要营养来源。

2. 酵母提取物(Yeast Extract):5 g/L  提供维生素、核苷酸和其他生长因子。

3. 氯化钠(NaCl):10 g/L  维持渗透压平衡,促进细菌细胞膜的稳定性。




No.2其他可能的调整


●配制固体培养基时,需添加**琼脂(Agar)(通常15-20 g/L)。

●某些配方会调整NaCl浓度(如LB-Miller培养基含10 g/L,而LB-Lennox含5 g/L),以适应不同实验需求。



No.3配制方法


1. 将上述成分溶解于去离子水中。

2. 调节pH至中性(约7.0-7.4)。

3. 高温高压灭菌(121°C,15-20分钟)。

4. 冷却后根据需要倒入培养皿(固体培养基)或分装至试管(液体培养基)。




No.4主要用途


1. 细菌扩增:用于大肠杆菌的常规培养、质粒提取或蛋白表达。

2. 克隆实验:在分子克隆中筛选转化后的细菌。

3. 抗生素筛选:通过添加抗生素(如氨苄青霉素、卡那霉素)筛选携带抗性基因的菌株。

4. 基础研究:适用于基因编辑、代谢分析等基础实验。




No.5优缺点


优点:成本低、配制简单、适用性广,适合快速培养非营养缺陷型细菌。

缺点:营养过于丰富,可能导致部分细菌代谢过快(如产生过量乙酸),影响长时间培养或高密度发酵。




No.6注意事项


1. 灭菌后若发现浑浊或沉淀,可能被污染,需重新配制。

2. 固体培养基需趁热倒板,避免琼脂凝固。

3. 若用于筛选抗生素抗性菌株,需在培养基冷却至约50°C时加入抗生素,避免高温破坏药物活性。




No.7名称来源


“LB”源于发明者萨尔瓦多·卢里亚(Salvador Luria)和朱塞佩·贝尔塔尼(Giuseppe Bertani),最初用于研究λ噬菌体的溶原性(lysogeny),因此也被称为“Lysogeny Broth”。


主营项目


1. 动物实验

动物饲养、疾病造模、行为学检测、心功能、无创血压、血常规、全自动生化检测等


2. 细胞实验

CCK8/MTT、原代细胞分离、流式细胞实验、细胞划痕、侵袭、迁移、EDU染色、转染、稳定株


3. 分子生物学

PCR检测、荧光定量PCR、绝对定量PCR、端粒酶长度、pull down、双荧光素酶、SSR、SNP检测等


4. 蛋白实验

WB、Co-IP、酵母双杂


5. 病理实验

HE染色、免疫组学、电镜


6. 生理生化实验

肝肾功能、抗氧化、免疫反应等生理免疫指标;动植物营养指标、微量元素、重金属、酶活等。


7. 多组学实验

基因组、转录调控、蛋白组、代谢组、微生物多样性、宏基因组、生信分析


8. 整体课题实验

方案设计、整体实验交付、标书写作、论文润色、协助投稿


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